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【儀器網(wǎng) 解決方案】近年來，市面上的多功能酶標儀不僅有傳統(tǒng)優(yōu)勢品牌形成三足鼎立之勢，還出現(xiàn)了很多后來者加入戰(zhàn)局。這些品牌在產(chǎn)品特性、技術參數(shù)、功能指標方面都截然不同，小編就為各位探討一下，選擇多功能酶標儀需要注意到的一些因素，希望能幫助各位找到適合的產(chǎn)品。
一、濾片Vs光柵
多功能酶標儀的分類方法眾多，但簡單的莫過于用他們的濾光方式來作分界線。一般來說，可以分為濾光片型和光柵型兩大類。當然也有一些機器里面同時裝上了濾光片和光柵。但是濾片和光柵并不能同時完成同一個檢測，還是想用光柵的時候用光柵，該用濾片的時候用濾片；還有一些實驗非用其中一個不可，另一模塊實現(xiàn)不了的。所以這類儀器本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起，并沒有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術突破。
總體來說，濾片技術由于發(fā)展已久，配合二向色鏡(其實也就是另一模式的濾光反光濾鏡)等光路系統(tǒng)，可以實現(xiàn)大部分實驗的需要。但是濾光片型儀器由于受限于濾片的波長和數(shù)量限制，不可能滿足日益增加的實驗類型的檢測需要，而且有時需要對物質(zhì)的吸收、激發(fā)和發(fā)射光譜進行研究，所以后來就誕生了光柵型的儀器。光柵型酶標儀的推陳出新，使得用戶在波長選擇上不再受限，而且在雜光率、帶寬控制等性能上還超越了濾光片系統(tǒng)。這些都是目前濾光片型酶標儀所不能或者較難實現(xiàn)的。
二、雜光率&波長準確性
光柵型濾光系統(tǒng)儼然已經(jīng)成為了目前通用性多功能酶標儀的主流，多家廠家共同努力，已經(jīng)把光柵技術推到了歷史新高。在光柵的眾多技術參數(shù)之中，關鍵的無疑就是光柵的雜光率和波長選擇的準確性了。
雜光率指得就是光源通過光柵后，得到的光線中，“不需要”的波長的光占所標稱波長的光的比例，表征了濾光的純度。由于光線干涉、衍射等的復雜性，無論使用濾光片還是光柵，雜光都是不可避免的。各種濾光技術的本質(zhì)就是要想辦法把雜光盡可能地去掉。
一般來說，濾光片型的雜光率在10-4～10-5之間，光柵型的可以做到10-6～10-7。由于此類雜光是非特異的，而且會直接進入檢測器，所以有多少的雜光就會引入多少的隨機誤差。在熒光等檢測過程中，由于檢測器存在放大效應，雜光率的干擾也會被指數(shù)級放大。因此，雜光率就是一個濾光系統(tǒng)的首要性能指標。
光柵的另一個重要指標就是波長選擇的準確性。因為很多檢測是依賴于物質(zhì)在某個波長的特征圖譜。就像DNA/RNA的OD260濃度測定，實際檢測波長偏離260nm幾個nm以上的話，OD值與濃度之間的數(shù)學關系就會發(fā)生改變。因此，一組性能優(yōu)良的光柵系統(tǒng)，他的波長選擇準確性應該是在±0.5～1nm之間。波長偏離過大有時就會影響到結果的準確性。
這兩個可謂是光柵甚至濾光片濾光系統(tǒng)關鍵的技術參數(shù)，直接影響到的是得到數(shù)據(jù)是否是真正所要測量的結果，是實驗結果可靠性的基本要求。
三、認證>參數(shù)
在保證檢測可靠的基礎上，不同儀器的下一個差異就體現(xiàn)在檢測的靈敏度上面，這時人們關心的就是儀器能夠檢測到多弱的信號。
靈敏度涉及了整個光路系統(tǒng)的設計和選料，很難說某一個部件會起決定性作用。但是有一點，在各種單功能檢測項目中，光吸收檢測用非放大型的光電二極管、熒光檢測用光電倍增管、發(fā)光檢測用專門設計的單光子計數(shù)光電倍增管，這三種不同的檢測器是各自檢測領域的優(yōu)先選擇。
各單項檢測的結果都是用相應檢測器完成的。當然也有的儀器出于成本等考慮，用一個檢測器兼容多種檢測模式，這在一定程度上也能完成實驗需求，但是在性能上也會有所犧牲折中，無法實現(xiàn)各項檢測都達到優(yōu)化。
關于靈敏度的定義和檢測標準，每個廠家都有各自的描述，都會說自己是怎樣怎樣好，很難有一個直觀的客觀比較。因此，某些試劑廠家就站了出來，對某些儀器的檢測性能提供一個第三方的認證。
比較常見的是發(fā)光檢測領域里面的Promega公司DLReady認證，熒光檢測領域的Invitrogen公司的LanthaScreen系列認證、Cisbio公司的HTRF認證、BellBrook實驗室的Transcreener認證等等。這些認證主要是針對公司提供的某一類型的要求較高的試劑盒，涵蓋了對檢測儀器的各種性能要求，包括：檢測方法是否能用，靈敏度、線性范圍、孔間干擾等是否滿足要求等等。
如果需要做相關的實驗，例如做Luciferase發(fā)光檢測的就看看儀器是否有DLReady認證、做TR-FRET的就看看HTRF認證、做FP就看看Transcreener認證，如果機器擁有相關的認證，就可以說明該機器在一定程度上能夠較好地滿足類似檢測的各種需求，遠比單單比較一個靈敏度參數(shù)更能說明問題。因為一個實驗能否做好并不是單單一個靈敏度就能表征的。
需要特別注意的是，LanthaScreen是一個系列的認證，涵蓋了FI、FRET、TRF、FP等多個子項目，不同儀器所通過的子項目是不一樣的，需要上Invitrogen網(wǎng)站仔細查詢核對。
光柵型的儀器由于新技術近幾年才逐漸興起，受限于技術研發(fā)和儀器成本，同一個價格范圍內(nèi)的靈敏度等指標會略差于發(fā)展成熟的濾光片機器。所以，在中檔多功能酶標儀領域，拿到了各種認證的光柵型儀器并不多見。
而作為新一代光柵型酶標儀的代表作，TECAN M1000已經(jīng)拿到了全部上述四種認證，而且在靈敏度等單項性能上也已經(jīng)超越了不少的中濾片型酶標儀。
這說明了光柵型酶標儀的研發(fā)又進入了一個新的高度，除了在靈活性上取得了*的作用外，還在檢測靈敏度等方面也逐漸替代傳統(tǒng)的濾光片型酶標儀。光柵型是科研領域多功能酶標儀的未來主要發(fā)展趨勢;而濾光片型儀器也正在往單項性能更優(yōu)的方面改進。
四、比色杯+微量檢測
除了常規(guī)的6～384/1536孔酶標板檢測之外，有些儀器還附帶了比色杯、微量檢測板等的兼容功能。無論是使用立式比色杯、臥式比色杯還是各種微量檢測板，其目的都是給光程不固定的酶標板檢測引入一個標準光程的概念。雖然酶標板檢測也能通過光程校正等方式實現(xiàn)10mm光程OD值的換算，但這只是一個數(shù)學轉(zhuǎn)換過程，檢測誤差累積較多，實際使用效果不佳。引入比色杯和微量檢測板后，光吸收的檢測光程就被固定在10mm或者0.5mm等的標準長度，OD值換算更加簡單和準確。附帶了此類檢測功能的酶標儀，相當于除了本身的多功能酶標檢測之外，還能替代部分分光光度計的功能，使其功能更加全面，儀器的性價比更高。
目前，部分品牌已經(jīng)在國內(nèi)多個城市設立了分公司、辦事處或者工程師。選購之前可以多與工程師交流，充分了解各家的性能特長和售后情況，反復對比，總能找到適合自己需要的一款多功能酶標儀。
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