蛋白組學分析,是蛋白質分析的一項非常重要的技術,一般會使用ESI-LCMS或者MALDI-TOFMS
Prominence nano具備納升流速下的高保留時間重復性,非常低的系統死體積和極低的交叉污染等特點。 基本性能 · 納升流速傳感器可保證精確的納升溶劑傳輸 納米輔助控制軟件的直觀操作 · 圖形界面直觀操作 蛋白質組分析的應用 · 高保留時間重復性 納升流速傳感器可保證精確的納升溶劑傳輸 LC-20AD nano采用了新的RFC技術,可對每一個泵進行獨立的流速控制,在納升流速下保證好的流量精度。的RFC系統是由高精度的納升流速感應器控制,確保在任何時間精準的流速測量。同時,流量傳感器配置了精確的溫度控制機制,以減少不確定的環境因素對溶劑輸送的影響。LC-20AD nano在梯度分析能保證很好的流速穩定性,在300nL/min時候保留時間重復性的RSD小于0.2%。 RFC系統的原理 低溶劑消耗 FCV納升閥,低死體積 高靈敏度分析 2維LC的輔助控制軟件 輔助控制軟件可對2維LC進行便捷設置,在軟件圖形界面上可輕松對2維HPLC的進行復雜梯度編程,設定流速等,然后生成方法文件并下載至儀器中進行控制,而圖形化的流路圖和梯度曲線代表當前狀態。簡便的設置可避免單獨使用LC控制軟件帶來的一系列的操作問題。 Prominence nano 2D系統在線的結合了離子交換和反向色譜模式(如下圖所示),每種色譜模式都獨立運行,兩種模式的結合可進行的分離。Prominence nano 2D系統可與配備Nano ESI源的LCMS系統聯用進行濕法蛋白組學分析,也可以與點靶儀和MALDI-TOF質譜聯用進行干法蛋白組學分析。 易操作的一維體系 高保留時間重復性 蛋白質組分析需要比較不同樣本的色譜峰差異,而樣本中又存在許多特征相似的多肽,對保留時間的重復性要求非常高。Prominence nano系統的高重復性可保證蛋白質組分析的高精數據,配置了RFC系統的LC-20AD nano可以在流速為300 nL/min獲得RSD不超過0.2% 的保留時間重復性。 2維 LC的高分辨率 分析條件 一維 柱 PolysulfoethylA (50mmL.×1mmI.D.) 流動相 甲酸銨緩沖液 流速 40 nL/min 捕集柱 (5 mmL.×300 ?m I.D.) 捕集時長 5分鐘 脫鹽溶劑 水/蟻酸=100/0.1 脫鹽流速 L/min 脫鹽時長 5分鐘 2維 柱 PicoFrit (100 mmL.×75 ?m I.D.) 流動相 梯度洗脫 流速 600nL/min 溫度 溫度 檢測 LCMS-IT-TOF 樣本 酵母蛋白中的蛋白 * 分別利用1維和2維中不同類型的柱體進行其他組合的分離模式也是可行的。在這種情況下,分離或檢測方法由于使用的移動相分離模式或類型之間的相互作用,可能會有一些限制。 連接MALDI-TOFMS使用 分析條件 檢測器 UV220 nm 柱 MonoCap for Fast-flow 快速MonoCap 流動相 1、水/乙腈/蟻酸=98/2/0.1(v/v) B) 水/乙腈/蟻酸=5/95/0.1(v/v) 流速 1 µL/min 溫度 環境溫度 捕捉柱 ODS (1 mmL. × 0.5 mm I.D.) 點靶間隔 12 秒的點斷
· RFC系統大大降低溶劑消耗
· 低容量納升閥---保證了低的系統死體積
· 高靈敏度分析
· 可視化監控儀器運行狀態
· 二維參數的便捷設置
· 二維LC的高分辨率
牛血清白蛋白(BSA)酶解樣品的重復性
濃度STEP梯度
L-column (micro)
A)水/乙腈/蟻酸=98/2/0.1(v/v) B) 水/乙腈/蟻酸=5/95/0.1(v/v)
(相當于200 fmol的)
酶解BSA樣品的UV色譜圖(500fmol)
(250 mmL. × 100 µm I.D.)
2、梯度洗脫
每點液體:200nL(不包括基質)
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