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.測(cè)定多肽，一般采用什么柱子？流動(dòng)相是乙腈和水，還有微量的TFA。特別是像類似三肽的短肽，應(yīng)該怎么選擇柱子？
答：分子量不高的多肽一般選用常規(guī)C18柱就能測(cè)定，也有用離子交換柱、水性C18柱和Hilic親水作用柱的。
5.氨基柱在進(jìn)酸性樣品時(shí)，很傷柱子，如使用一段時(shí)間后，柱效降低，峰形改變，如何恢復(fù)？
答：氨基柱測(cè)酸性樣品，應(yīng)該是用氨基柱的HILIC模式。酸的存在可能會(huì)使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化，導(dǎo)致使用一段時(shí)間后對(duì)于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。建議：用5～10倍的柱體積的含0.5～1.0％NH3的乙腈-水(50：50)溶液沖洗該柱（沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動(dòng)相洗去多余氨），之后，再進(jìn)行分析這類酸性分析物時(shí)建議在流動(dòng)相中略微添加少許氨如，0.1％。
6.色譜柱的技術(shù)都有哪些？比如，封尾等，這些技術(shù)在應(yīng)用時(shí)都體現(xiàn)在哪里？
答：色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù)，填料技術(shù)自不待言，填料的好壞對(duì)色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡(jiǎn)單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長(zhǎng)度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床，更多是一門藝術(shù)，需要經(jīng)驗(yàn)積累。
國(guó)內(nèi)和國(guó)外想比，我認(rèn)為色譜柱的差距在于：國(guó)內(nèi)公司以前都不會(huì)自己開發(fā)填料，一般買國(guó)外現(xiàn)成填料裝柱，買到的填料質(zhì)量控制權(quán)不在自己手里。另外因?yàn)檠b柱歷史短，經(jīng)驗(yàn)積累少，裝柱工藝也沒有*達(dá)到國(guó)外水平。另外，對(duì)色譜柱性能很關(guān)鍵的基礎(chǔ)材料——裸硅膠，國(guó)產(chǎn)的還不過關(guān)，在純度、粒徑和孔徑的均一性方面和國(guó)外產(chǎn)品相比，差距很大。
7.色譜柱技術(shù)的差距在哪里？
答：色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù)，填料技術(shù)自不待言，填料的好壞對(duì)色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡(jiǎn)單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長(zhǎng)度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床，更多是一門藝術(shù)，需要經(jīng)驗(yàn)積累。
國(guó)內(nèi)和國(guó)外想比，我認(rèn)為色譜柱的差距在于：國(guó)內(nèi)公司以前都不會(huì)自己開發(fā)填料，一般買國(guó)外現(xiàn)成填料裝柱，買到的填料質(zhì)量控制權(quán)不在自己手里。另外，因?yàn)?，裝柱歷史短，經(jīng)驗(yàn)積累少，裝柱工藝也沒有*達(dá)到國(guó)外水平。另外，對(duì)色譜柱性能很關(guān)鍵的基礎(chǔ)材料——裸硅膠，國(guó)產(chǎn)的還不過關(guān)，在純度、粒徑和孔徑的均一性方面和國(guó)外產(chǎn)品相比，差距很大。
8.柱子在什么情況下可以清洗一下篩板呢？原來也討論過這個(gè)問題，我也拆下來清洗過，但我看到柱前段的污染更甚，于是就用刀片刮了刮，然后把清洗好的篩板安裝上去。問題解決了，但使用壽命會(huì)不會(huì)減少呢？
答：柱頭污染了，就取出污染的，再裝一些填料。因?yàn)?，加入你刮了些填料，那么微觀的塔板數(shù)就少了。假入你刮得不多，僅表面，可能就是一些臟物，所以，問題解決，但是，今后還會(huì)有同樣問題，再掛，那么不小心刮，影響柱效。建議還是裝一個(gè)預(yù)柱。
9.如果柱子取下來放置一段時(shí)間，需要做什么保護(hù)嗎？
答：對(duì)一般的反相柱，也就是洗干凈后放到純甲醇（乙腈）或者是80%左右的甲醇（乙腈）水中，然后用堵頭塞緊柱兩頭，以免保存溶劑揮發(fā)，應(yīng)該不需要做特殊的保護(hù)。
10.流動(dòng)相中加入適量的si氫fu喃可以改善峰形的機(jī)理是什么？
答：《高效液相色譜方法及應(yīng)用》于世林編著的上面說：甲醇為質(zhì)子給予體、乙腈為質(zhì)子接受體、si氫fu喃是偶極溶劑，應(yīng)該除了極性影響，還有另外的影響因素，至于分離機(jī)理，還是比較復(fù)雜的，不能看成是個(gè)萬(wàn)能方法。
11.關(guān)于色譜柱的填裝問題！我個(gè)人認(rèn)為現(xiàn)在色譜柱的填裝一般有3種情況：
①國(guó)外生產(chǎn)填料并填裝完成成品賣到國(guó)內(nèi)；
②國(guó)外生產(chǎn)填料，國(guó)內(nèi)填裝銷售；
③國(guó)內(nèi)生產(chǎn)填料，國(guó)內(nèi)填裝銷售。
一般情況下，第1種情況賣的貴，也質(zhì)量！可是我就不明白了：如果是填料的生產(chǎn)很復(fù)雜的話，那么填裝上國(guó)內(nèi)也跟不上去嗎？為什么換在國(guó)內(nèi)填裝就會(huì)出現(xiàn)或多或少的一些小問題呢？
答：國(guó)內(nèi)填裝會(huì)出現(xiàn)質(zhì)量小問題，和國(guó)內(nèi)目前普遍做事沒有國(guó)外嚴(yán)謹(jǐn)有關(guān)吧。如果工藝技術(shù)上沒有問題，又能制訂并切實(shí)執(zhí)行一整套嚴(yán)格的生產(chǎn)質(zhì)量管理措施，國(guó)內(nèi)填裝和國(guó)外填裝并無(wú)區(qū)別。
